. . "Candida albicans est une levure saprophyte pr\u00E9sente dans la flore digestive humaine. Elle peut n\u00E9anmoins devenir pathog\u00E8ne chez des individus immunod\u00E9ficients et causer des infections s\u00E9v\u00E8res associ\u00E9es \u00E0 de forts taux de mortalit\u00E9. La paroi de C. albicans, en contact avec l\u2019h\u00F4te, contient des \u03B2-1,2 oligomannosides (\u03B2-Man) li\u00E9s \u00E0 de multiples mol\u00E9cules pari\u00E9tales telles que le phospholipomannane (PLM) ou le phosphopeptidomannane (PPM). Ces \u03B2-Man sont pr\u00E9sents dans les esp\u00E8ces les plus pathog\u00E8nes de Candida (principalement C. albicans, mais \u00E9galement C. glabrata et C. tropicalis) et sont consid\u00E9r\u00E9s comme des facteurs de virulence. L\u2019identification d\u2019une famille de 9 g\u00E8nes codant pour des \u03B2-mannosyltransf\u00E9rases (CaBmt) a permis une meilleure compr\u00E9hension du r\u00F4le de 6 de ces enzymes. Des \u00E9tudes de g\u00E9n\u00E9tique inverse ont montr\u00E9 que la \u03B2-1,2-mannosylation du PPM \u00E9tait assur\u00E9e par les enzymes CaBmt1 \u00E0 4, tandis que CaBmt5 et 6 \u00E9taient impliqu\u00E9es dans celle du PLM. Une premi\u00E8re enzyme responsable de l\u2019initiation de la \u03B2-mannosylation du PPM, CaBmt1, a donc \u00E9t\u00E9 caract\u00E9ris\u00E9e dans l\u2019\u00E9quipe gr\u00E2ce \u00E0 l\u2019\u00E9tude de l\u2019activit\u00E9 d\u2019une forme recombinante soluble.L\u2019objectif de cette th\u00E8se est de caract\u00E9riser l\u2019activit\u00E9 et la structure de CaBmt3, l\u2019enzyme qui initie la polym\u00E9risation des \u03B2-Man suite \u00E0 l\u2019action de CaBmt1, pour mieux comprendre le m\u00E9canisme catalytique des \u03B2-1,2-mannosyltransf\u00E9rases. Ainsi, nous avons pr\u00E9cis\u00E9ment identifi\u00E9 le substrat accepteur de CaBmt3 et d\u00E9fini ses param\u00E8tres enzymatiques. Par une approche combinant la diffusion des rayons X aux petits angles (SAXS), la mod\u00E9lisation mol\u00E9culaire in silico et la mutagen\u00E8se dirig\u00E9e de prot\u00E9ines recombinantes, nous proposons un mod\u00E8le structural et catalytique de CaBmt3 qui pourrait \u00EAtre \u00E9tendu \u00E0 l\u2019ensemble de la famille. En parall\u00E8le, nous avons montr\u00E9 que des iminosucres mono- et multivalents \u00E9taient capables de moduler l\u2019activit\u00E9 des \u03B2-mannosyltransf\u00E9rases. Enfin, nous avons amorc\u00E9 le travail sur une derni\u00E8re enzyme, CaBmt4, qui est susceptible de polym\u00E9riser le \u03B2-Man initi\u00E9 par CaBmt1 et CaBmt3. Pour conclure, ces travaux offrent une meilleure compr\u00E9hension de la \u03B2-mannosylation du PPM de C. albicans. Ces \u00E9tudes fonctionnelles, coupl\u00E9es aux avanc\u00E9es structurales, pourraient conduire \u00E0 l\u2019\u00E9laboration d\u2019inhibiteurs de CaBmt et d\u00E9velopper ainsi de nouvelles approches th\u00E9rapeutiques contre les candidoses invasives." . "2016" . . . . . . . . "Paroi cellulaire -- Dissertation universitaire" . "Glycosyltransferase -- Dissertation universitaire" . . "Candida albicans is a saprophytic yeast of human gastro-intestinal tract. It can however become pathogenic in immunocompromised individuals and cause severe infections associated with high mortality rates. The cell wall of C. albicans, in contact with the host, contains \u03B2-1,2 oligomannosides (\u03B2-Man) linked to several parietal molecules such as phospholipomannan (PLM) and phosphopeptidomannan (PPM). These \u03B2-Man are found in the most pathogenic Candida species (primarily C. albicans, but also in non-albicans species such as C. glabrata and C. tropicalis) and are considered as virulence factors. The identification of a family of 9 genes coding for \u03B2-mannosyltransferases (CaBmt) led to a better understanding of the role of 6 of these enzymes. Reverse genetics studies showed that CaBmt1-4 were responsible for the \u03B2-1,2-mannosylation of PPM, whereas CaBmt5-6 were involved in the \u03B2-1,2-mannosylation of PLM. A first enzyme responsible for the initiation of the PPM\u2019s \u03B2-mannosylation, CaBmt1, was characterized in the lab by studying the activity of its recombinant soluble form.The goal of this thesis is to characterize both activity and structure of CaBmt3, the enzyme initiating \u03B2-Man polymerization following CaBmt1\u2019s activity, in order to further the understanding of \u03B2-1,2-mannosyltransferases catalytic mechanism. Thus, we precisely identified CaBmt3 acceptor substrate and characterized its enzymatic parameters. Combining small angle X-ray diffraction (SAXS), in silico molecular modelization and site-directed mutagenesis of recombinant proteins, we propose a structural and catalytic model of CaBmt3 which could be extended to the whole family. In parallel, we showed that mono- and multivalent iminosugars were able to modulate \u03B2-mannosyltransferases activity. Finally, we started to work on one last enzyme, CaBmt4, which could potentially polymerize the \u03B2-Man initiated by CaBmt1 and CaBmt3.In conclusion, the synthesis of these investigations offers a better understanding of the \u03B2-mannosylation processes occurring on the PPM of C. albicans. Functional studies, in conjunction with structural advances could ultimately lead to the development of CaBmt inhibitors in order to design new therapeutic approaches for the management of invasive candidiasis." . "Candida albicans -- Dissertation universitaire" . . . "Paroi cellulaire" . . . "Th\u00E8ses et \u00E9crits acad\u00E9miques" . "Candida albicans" . "Text" . . "Levures -- Dissertation universitaire" . . "Mannose" . . . . "Relations structure-fonction des \u03B2-1,2-mannosyltransf\u00E9rases de Candida albicans, vers une meilleure compr\u00E9hension de la \u03B2-mannosylation du phosphopeptidomannane" . "Relations structure-fonction des \u03B2-1,2-mannosyltransf\u00E9rases de Candida albicans, vers une meilleure compr\u00E9hension de la \u03B2-mannosylation du phosphopeptidomannane" . "Glycosyltransf\u00E9rases" . . "Mannanes -- Dissertation universitaire" . . "Levure (agent de fermentation)" . . "Structure-function interactions of \u03B2-1,2-mannosyltransferases of Candida albicans, toward a better understanding of phosphopeptidomannan's \u03B2-mannosylation" . "Prot\u00E9ines fongiques -- Dissertation universitaire" . . .