. . . . . "Complexes prot\u00E9iques" . "Prot\u00E9ines -- Purification" . "Prot\u00E9omique" . . . "Text" . "Chromatine" . . "Histones" . "Prot\u00E9ines -- Modifications posttraductionnelles" . . "Analyse prot\u00E9omique des complexes associ\u00E9s aux membres de la famille CBX (HP1 et Polycomb) dans des cellules humaines" . . "Dans le noyau des cellules eucaryotes, l\u2019ADN est associ\u00E9 aux histones pour former la chromatine. Les extr\u00E9mit\u00E9s terminales des histones peuvent subir un grand nombre de modifications posttraductionnelles r\u00E9versibles (m\u00E9thylation, ac\u00E9tylation, phosphorylation, ubiquitinylation\u2026). Certaines de ces marques \u00E9pig\u00E9n\u00E9tiques d\u00E9finissent des domaines chromatiniens particuliers du noyau. Les trim\u00E9thylations des lysines 9 et 27 de l\u2019histone H3 (H3K9me3 et H3K27me3) correspondent respectivement \u00E0 des domaines d\u2019h\u00E9t\u00E9rochromatine constitutive et d\u2019h\u00E9t\u00E9rochromatine facultative. Les proteines qui poss\u00E8dent un chromo-domaine sont capables de se lier \u00E0 des lysines m\u00E9thyl\u00E9es, et permettent de recruter des complexes qui ont une activit\u00E9 enzymatique ou m\u00E9canique sur la chromatine. Les prot\u00E9ines de la famille CBX (ChromoBoX) poss\u00E8dent toutes un chromodomaine, elles sont subdivis\u00E9es en 2 groupes: les prot\u00E9ines du groupe HP1 (CBX1, CBX3 et CBX5) et celles du groupe Polycomb (CBX2, CBX4, CBX6, CBX7 et CBX8) qui se fixent respectivement sur H3K9me3 et H3K27me3, respectivement. Afin de mieux comprendre comment s\u2019organise la chromatine au niveau des r\u00E9gions h\u00E9t\u00E9rochromatiques, nous avons purifi\u00E9, en condition native, les complexes associ\u00E9s \u00E0 ces 8 prot\u00E9ines dans des cellules humaines en culture. Pour ce faire, nous avons opt\u00E9 pour la purification d\u2019affinit\u00E9 en tandem (TAP). Les prot\u00E9ines co-\u00E9lu\u00E9es ont \u00E9t\u00E9 identifi\u00E9es par spectrom\u00E9trie de masse. Nos r\u00E9sultats confirment que, d\u2019une part les prot\u00E9ines du groupe Polycomb sont associ\u00E9es au complexe PRC1 (Polycomb Repressive Complex 1). Toutefois, ces prot\u00E9ines sont mutuellement exclusives au sein du complexe PRC1, indiquant qu\u2019il existe plusieurs complexes PRC1 de composition distincte dans la cellule. D\u2019autre part, de nouveaux partenaires associ\u00E9s aux prot\u00E9ines du groupe HP1 ont \u00E9t\u00E9 identifi\u00E9s. La mise au point et le d\u00E9veloppement de la technologie TAP sur des cellules humaines en culture nous ont permis de purifier des complexes associ\u00E9s \u00E0 la chromatine. Cette technique demeure un outil biochimique efficace pour la purification de complexes prot\u00E9iques" . "Proteomic analysis of CBX-containing complexes (HP1 and Polycomb) from human cells" . "Analyse prot\u00E9omique des complexes associ\u00E9s aux membres de la famille CBX (HP1 et Polycomb) dans des cellules humaines" . . . "In the nucleus of eukaryotic cells, DNA is wrapped around histones to form chromatin. The terminal ends of histones may undergo many reversible post-translational modifications (methylation, acetylation, phosphorylation, ubiquitinylation...). Some of these epigenetic marks define specific chromatic regions in the nucleus. The tri-methylation of lysines 9 and 27 of histone H3 (H3K9me3 and H3K27me3) correspond respectively to constitutive and facultative heterochromatin. Chromo-domain containing proteins can bind to methylated lysines, and can recruit complexes having enzymatic or mechanical activity on chromatin. All the members of the CBX (ChromoBoX) family contain a chromodomain, they are divided into 2 groups: the HP1 group (CBX1, CBX3 and CBX5) and the Polycomb group (CBX2, CBX4, CBX6, CBX7 and CBX8) able to bind to H3K9me3 and H3K27me3, respectively. To better understand how the chromatin is organized in heterochromatic regions we purified, in native condition, the complexes associated with these 8 proteins from human cells in culture. To this end, we opted for the tandem affinity purification (TAP). The co-eluted proteins were identified by mass spectrometry. Our results confirm that firstly, Polycomb group proteins are involved in PRC1 complex (Polycomb Repressive Complex 1). However, these proteins are mutually exclusive in the PRC1 complex, indicating that several PRC1 of distinct compositions co-exist in the cell. On the other hand, new partners associated with HP1 group were identified. The development of the TAP technology to cultured human cells allowed us to purify complexes associated with chromatin. This technique remains an effective tool for the biochemical purification of protein complexes." . . . . . "2009" . "Th\u00E8ses et \u00E9crits acad\u00E9miques" . "Prot\u00E9ines de liaison" . .