"Cellule souche leuc\u00E9mique" . . "Leuc\u00E9mie" . . . "Text" . "H\u00E9matopo\u00EF\u00E8se" . . . "Cytom\u00E9trie en flux" . "Apport de la cytom\u00E9trie en flux \u00E0 l'\u00E9tude des leuc\u00E9mies aig\u00FCes my\u00E9lo\u00EFdes" . "Apport de la cytom\u00E9trie en flux \u00E0 l'\u00E9tude des leuc\u00E9mies aig\u00FCes my\u00E9lo\u00EFdes" . . . . . "Th\u00E8ses et \u00E9crits acad\u00E9miques" . . "PI3K" . "Contribution of flow cytometry in the study of acute myeloid leukemia" . "2014" . . "Acute myeloid leukemias (AML) are the most common adult leukemias. Their incidence grows every year. The leukemic stem cell (LSC) arises from a hematopoietic stem cell (HSC) or a more differentiated progenitor that accumulates oncogenic mutations. LSC initiates leukemia and resist to current chemotherapies. Leukemic cells are very accessible at diagnose or relapse by flow cytometry (FCM). This technology allows to phenotype cells with fluorochrome labeled antibodies. We can identify that one cell is (i) committed in a maturation process or (ii) belonging to cellular sub-population or (iii) chemoresistant. And hundreds of thousands of cells can be processed. HSC differentiates in more committed progenitors then in mature blood cells. Leukemogenesis blocks this commitment. Enlarged phenotype of normal hematopoietic precursors allows us to determine the blockage stage of AML. This blockage stage is correlated with oncogenic mutations. Earlier in hematopoiesis it is, worse is the patient prognosis. Identification of blockage stages by FCM allows thinking about new therapeutics. Chemoresistant LSC are enriched in the leukemic sub-population CD34+CD38-CD123+. The percentage of CD34+CD38-CD123+ cells has been determined by FCM in 111 AML patients less than 65 and intensively treated. Response to treatment is lower in patients with more than 15% of LSC. Overall and disease free survivals are decreased in patients with more than 1% of LSC. Globally, percentage of LSC determined by FCM is a prognostic factor in AML easily applicable in daily practice. PIK-75, an inhibitor of isoform p110alpha of PI3K, importantly induces apoptosis in leukemic bulk and LSC, as shown by AnnV/7AAD FCM positivity. Originally, PIK-75 blocks PI3K pathway and CDK7/9 pathway that in turn stops MCL-1 transcription. Mcl-1 is a member of the Bcl-2 family and a key driver of leukemic cell survival. Sensitivity of leukemic cells to PIK-75 is largely dependent of the expression of BAK. FCM allows a quick in vitro screen of inhibitory compounds to seek for new targets and resistance in leukemic cells. FCM is a technology that fit well to AML, a heterogeneous pathology. It allows us to decrypt leukemogenesis mechanism, to identify chemoresistant leukemic subsets and to evaluate new drugs; which make of this, one of the first tools in AML research and clinic." . "Leuc\u00E9mie aig\u00FCe my\u00E9lo\u00EFde" . "Cytom\u00E9trie de flux" . "Les leuc\u00E9mies aigu\u00EBs my\u00E9lo\u00EFdes (LAM) sont les leuc\u00E9mies les plus fr\u00E9quentes de l'adulte. Leur incidence augmente chaque ann\u00E9e. La cellule souche leuc\u00E9mique (CSL) d\u00E9rive d'une cellule souche h\u00E9matopo\u00EF\u00E9tique (CSH) ou d'un prog\u00E9niteur plus diff\u00E9renci\u00E9, ayant accumul\u00E9 plusieurs mutations oncog\u00E9niques. Elle est \u00E0 l'origine de la leuc\u00E9mie et r\u00E9siste aux chimioth\u00E9rapies actuelles. Les cellules leuc\u00E9miques sont d'acc\u00E8s facile au diagnostic et \u00E0 la rechute, par cytom\u00E9trie en flux (CMF). Cette technologie permet de ph\u00E9notyper les cellules \u00E0 l'aide d'anticorps marqu\u00E9s avec des fluorochromes. Nous pouvons ainsi identifier une cellule (i) engag\u00E9e dans un processus de maturation ou (ii) appartenant \u00E0 une sous-population cellulaire ou (iii) r\u00E9sistante \u00E0 une chimioth\u00E9rapie. Et des centaines de milliers de cellules peuvent \u00EAtre ph\u00E9notyp\u00E9es. La CSH se diff\u00E9rentie en prog\u00E9niteurs puis en cellules sanguines matures. Les m\u00E9canismes de leuc\u00E9mogen\u00E8se bloquent cette diff\u00E9rentiation. Le ph\u00E9notype \u00E9tendu des pr\u00E9curseurs h\u00E9matopo\u00EF\u00E9tiques permet de d\u00E9terminer le stade de blocage des leuc\u00E9mies. Ce blocage corr\u00E8le avec les mutations oncog\u00E9niques. Plus le blocage intervient t\u00F4t dans le processus de diff\u00E9rentiation et plus le pronostic des patients est p\u00E9joratif. L'identification du stade de blocage par CMF permet d'envisager de nouvelles voies th\u00E9rapeutiques. Les CSL chimior\u00E9sistantes sont enrichies dans la sous-population leuc\u00E9mique CD34+CD38-CD123+. Le pourcentage de cellules CD34+CD38-CD123+ a \u00E9t\u00E9 d\u00E9termin\u00E9 par CMF chez 111 patients de moins de 65 ans atteints de LAM et trait\u00E9 par chimioth\u00E9rapie intensive. La r\u00E9ponse au traitement est mauvaise chez les patients qui ont plus de 15% de CSL. Les survies globale et sans maladie sont impact\u00E9es chez les patients qui ont plus de 1% de CSL. Le pourcentage de CSL, d\u00E9termin\u00E9 par CMF, est un facteur pronostic des LAM facilement applicable \u00E0 la pratique clinique. PIK-75, un inhibiteur de la sous-unit\u00E9 p110alpha des PI3K, est un puissant inducteur d'apoptose des cellules leuc\u00E9miques et des CSL, comme l'indique la positivit\u00E9 en annexine V et 7-AAD par CMF. De fa\u00E7on originale, PIK-75 bloque les voies PI3K et CDk7/9 qui stoppe la transcription de MCL-1, un membre de la famille de Bcl-2 et un acteur important de la survie des cellules de LAM. La sensibilit\u00E9 des cellules leuc\u00E9miques \u00E0 PIK-75 est d\u00E9pendante de l'expression de BAK. La CMF permet un criblage in vitro rapide de mol\u00E9cules inhibitrices, \u00E0 la recherche de nouvelles cibles et r\u00E9sistance dans les cellules leuc\u00E9miques. La CMF est une technologie adapt\u00E9e \u00E0 la LAM qui est une pathologie h\u00E9t\u00E9rog\u00E8ne. Elle permet de d\u00E9crypter les m\u00E9canismes de leuc\u00E9mogen\u00E8se, identifier les sous-populations chimior\u00E9sitantes et \u00E9valuer de nouvelles th\u00E9rapeutiques, ce qui la place au premier plan de la recherche et de la clinique des LAM." .