"Group X secreted phospholipase A2, protelolytic maturation and functional roles" . . "Paludisme" . . "Phospholipase A2" . . . "Propeptide" . . "Text" . "2009" . "Spermatogen\u00E8se" . . . . "La phospholipase A2 s\u00E9cr\u00E9t\u00E9e de groupe X, maturation prot\u00E9olytique et r\u00F4les fonctionnels" . "Maturation ovocytaire in vitro" . . "La phospholipase A2 s\u00E9cr\u00E9t\u00E9e de groupe X, maturation prot\u00E9olytique et r\u00F4les fonctionnels" . "Prot\u00E9ases" . . "Th\u00E8ses et \u00E9crits acad\u00E9miques" . . "The superfamily of phospholipase A2 currently consists of at least eleven secreted phospholipases A2 (sPLA2s) and twelve intracellular phospholipases A2. These proteins catalyze the hydrolysis of phospholipids at the sn-2 position, releasing free fatty acids and lysophospholipids. Furthermore, phospholipase A2 controls the production of a variety of lipid mediators which are important for multiple cellular functions in various physiological or physiopathological contexts such as inflammatory diseases and cancer. Group X sPLA2 was cloned in 1997 and have peculiar molecular properties. SPLA2-X has the most potent hydrolyzing activity toward phosphatidylcholine and is involved in arachidonic acid (AA) release. sPLA2-X is produced as a proenzyme and has a propeptide of 11 amino acids ending with a dibasic motif. The cellular location and the protease (s) involved in proenzyme conversion have remained unclear. The work of this thesis has allowed to better defining the way by which the maturation of group X sPLA2 can be made and how this sPLA2 functions at both physiological and physiopathological levels. Our in vitro studies with recombinant group X proenzymes and transfected cells (HEK293) have shown that furin-like protease plays a major role in the activation of the enzyme during its secretion. Our work also suggests that the removal of the propertied can also occur via other proteases and extracellularly as found when using the human colon cancer cell line LOVO as a cellular model. We also studied the maturation of sPLA2-X in mouse tissues in various physiological and physiopathological conditions. Of note, we found that sPLA2-X is stored in large amount and likely in an active form in the acrosome of mouse sperm cells. Finally, we discovered a human polymorphism in the propeptide sequence mutating Arg-38 into cysteine and leading to the secretion of an inactive protein that is rapidly degraded after synthesis. In the second part of this thesis, we have shown that the active form of sPLA2-X, but not its proenzyme is able i) to stimulate the proliferation of various mouse colon cell lines, including Colon-26 cancer cells, ii) to protect human red blood cells from infection by P. falciparulmn the parasite of malaria, and iii) to control the acrosomal reaction of mouse sperm during capacitation with an important impact on the outcome of in vitro fertilization." . . . "Les phospholipases A2 constituent une superfamille de prot\u00E9ines comprenant au moins onze phospholipases A2 s\u00E9cr\u00E9t\u00E9es (sPLA2) et douze phospholipases A2 intracellulaires. Ces prot\u00E9ines catalysent l'hydrolyse des phospholipides en position sn-2, lib\u00E9rant un acide gras et un lysophospholipide. Elles contr\u00F4lent ainsi la production d'une vari\u00E9t\u00E9 de m\u00E9diateurs lipidiques qui sont importants pour de multiples fonctions cellulaires dans diff\u00E9rents contextes physiologiques ou physiopathologiques (maladies inflammatoires et cancer). La sPLA2 de groupe X a \u00E9t\u00E9 clon\u00E9e au laboratoire en 1997 et poss\u00E8de des propri\u00E9t\u00E9s mol\u00E9culaires uniques. Son ARN messager est pr\u00E9sent dans diff\u00E9rents tissus, mais semble peu r\u00E9gul\u00E9 par des stimuli proinflammatoires. L'enzyme est unique dans sa capacit\u00E9 \u00E0 lib\u00E9rer des m\u00E9diateurs lipidiques \u00E0 partir des phopholipides cellulaires ou des lipoprot\u00E9ines et poss\u00E8de aussi des propri\u00E9t\u00E9s antimicrobiennes vari\u00E9es. Un \u00E9l\u00E9ment cl\u00E9 de la r\u00E9gulation fonctionnelle de la sPLA2 de groupe X est vraisemblablement li\u00E9 \u00E0 la pr\u00E9sence d'un propeptide dans sa partie N-terminale. Le lieu de la maturation prot\u00E9olytique de sPLA2 de groupe X (dans la cellule avant s\u00E9cr\u00E9tion ou \u00E0 l'ext\u00E9rieur apr\u00E8s s\u00E9cr\u00E9tion du proenzyme), les prot\u00E9ases impliqu\u00E9es et la r\u00E9gulation de cette maturation dans des conditions physiologiques ou physiopathologiques sont inconnus. Le travail de cette th\u00E8se a permis de mieux comprendre comment peut s'effectuer la maturation de la sPLA2 de groupe X et quels sont ses r\u00F4les physiologiques et physiopathologiques. Concernant la maturation, nos \u00E9tudes in vitro sur prot\u00E9ines purifi\u00E9es et en cellules transfect\u00E9es (HEK293) ont permis de montrer qu'une prot\u00E9ase de type furine contribue de fa\u00E7on majeure \u00E0 l'activation de l'enzyme, vraisemblablement au cours de sa s\u00E9cr\u00E9tion. Nos travaux sugg\u00E8rent aussi qu'une maturation est possible par d'autres prot\u00E9ases et dans le milieu extracellulaire comme par exemple dans les cellules LOVO. Nous avons aussi tent\u00E9 de mettre en \u00E9vidence cette maturation dans des tissus murins dans certaines conditions physiologiques et physiopathologiques. Nous avons notamment trouv\u00E9 que la sPLA2-X \u00E9tait la sPLA2 majeure pr\u00E9sente dans l'acrosome des spermatozo\u00EFdes. Enfin nous avons observ\u00E9 un polymorphisme pr\u00E9sent dans le propeptide de la sPLA2 humaine qui conduit \u00E0 la formation d'une prot\u00E9ine inactive et rapidement d\u00E9grad\u00E9e. Dans la deuxi\u00E8me partie de cette th\u00E8se, nous avons montr\u00E9 que la forme active de la sPLA2 de groupe X, mais pas son proenzyme \u00E9tait capable i) de stimuler la prolif\u00E9ration cellulaire dans un contexte de cancer colorectal, ii) d'exercer une action toxique contre le parasite de la malaria P. falciparum lors de l'infection de globules rouges humains, et iii) de contr\u00F4ler la r\u00E9action acrosomique des spermatozo\u00EFdes de souris, avec un impact important sur le taux de f\u00E9condit\u00E9 dans des tests de f\u00E9condation in vitro." . "M\u00E9diateurs lipidiques" . . . "Cellules -- Prolif\u00E9ration" . . .