. . . "L\u2019objectif de ce travail est de contribuer \u00E0 la mise en place d\u2019une approche int\u00E9gr\u00E9e combinant des outils in vitro et in vivo pour l\u2019\u00E9valuation des effets oestrog\u00E9niques de substances chimiques chez une esp\u00E8ce mod\u00E8le, le poisson z\u00E8bre. Dans ce but, de nouvelles lign\u00E9es cellulaires de poisson avec g\u00E8ne rapporteur lucif\u00E9rase ont \u00E9t\u00E9 \u00E9tablies et compar\u00E9es avec des mod\u00E8les in vitro existant pour appr\u00E9hender de possibles diff\u00E9rences inter-esp\u00E8ces (r\u00E9cepteurs de truite, humain et poisson z\u00E8bre) et/ou inter mod\u00E8les cellulaires. Dans un premier temps, la comparaison des effets de divers x\u00E9no-oestrog\u00E8nes sur les r\u00E9cepteurs des oestrog\u00E8nes humains (hER) ou de truite arc-en-ciel (rtER) a mis en \u00E9vidence la s\u00E9lectivit\u00E9 de certaines familles de compos\u00E9s pour le rtER, comme les myco-oestrog\u00E8nes et les d\u00E9riv\u00E9s de la benzoph\u00E9none (BPs) d\u00E9montrant ainsi l\u2019int\u00E9r\u00EAt de l\u2019utilisation de mod\u00E8les sp\u00E9cifiques du poisson pour l\u2019\u00E9valuation des effets sur les esp\u00E8ces aquatiques. Dans un second temps, trois nouveaux mod\u00E8les cellulaires sp\u00E9cifiques du poisson z\u00E8bre exprimant les trois isoformes du r\u00E9cepteur des oestrog\u00E8nes du poisson z\u00E8bre (zfER) ont \u00E9t\u00E9 d\u00E9velopp\u00E9s dans la lign\u00E9e h\u00E9patique ZFL (zebrafish liver). Ces trois nouvelles lign\u00E9es cellulaires (ZELH-zfER\u03B1, ZELH-zfER\u03B21 et ZELH-zfER\u03B22) ont \u00E9t\u00E9 caract\u00E9ris\u00E9es vis-\u00E0-vis de divers ligands de r\u00E9f\u00E9rence, et ont permis de mettre en \u00E9vidence des affinit\u00E9s variables selon les r\u00E9cepteurs. Dans une derni\u00E8re partie, ces nouvelles lign\u00E9es ont \u00E9t\u00E9 utilis\u00E9es, en combinaison avec des mesures d\u2019effet in vivo pour l\u2019\u00E9valuation des effets oestrog\u00E9niques de 10 BPs, utilis\u00E9s comme filtres anti-UV dans de nombreux produits et ont r\u00E9cemment \u00E9t\u00E9 d\u00E9tect\u00E9s dans l\u2019environnement aquatique. Une bonne ad\u00E9quation est not\u00E9e entre les effets in vitro des BP sur le zfER\u03B22 et leur capacit\u00E9 \u00E0 induire in vivo l\u2019expression de l\u2019aromatase c\u00E9r\u00E9brale (Aro b) au stade larvaire (0 \u00E0 5 jours post fertilisation) mesur\u00E9e \u00E0 l\u2019aide d\u2019une lign\u00E9e de poisson z\u00E8bre transg\u00E9nique exprimant la GFP sous contr\u00F4le du promoteur du g\u00E8ne cyp19a1b. Il existe par ailleurs certaines discordances dans les effets oestrog\u00E9niques entre les diff\u00E9rents niveaux d\u2019organisation biologiques. Par exemple, la benzoph\u00E9none 2 (BP2) est fortement oestrog\u00E9nique in vitro et in vivo chez le m\u00E2le adulte (induction de vitellog\u00E9nine), mais est sans effet au stade larvaire. En revanche, la BP3 est faiblement oestrog\u00E9nique in vivo (Vtg) et in vitro uniquement sur le mod\u00E8le ZELH-zfER\u03B22. En conclusion, cette \u00E9tude souligne l\u2019int\u00E9r\u00EAt de l\u2019utilisation combin\u00E9e d\u2019outils de criblage in vitro (e.g. mod\u00E8les ZELH-zfER) et in vivo (e.g. arob-GFP) permettant une \u00E9valuation \u00E0 diff\u00E9rents niveaux d\u2019organisation biologique." . . "Danio rerio -- Reproduction (biologie)" . . . . "Evaluation int\u00E9gr\u00E9e in vitro et in vivo des effets oestrog\u00E9niques de substances environnementales chez le poisson z\u00E8bre" . "Danio rerio -- Effets de la pollution de l'eau" . "Evaluation int\u00E9gr\u00E9e in vitro et in vivo des effets oestrog\u00E9niques de substances environnementales chez le poisson z\u00E8bre" . . "2010" . . . "The aim of the present work is to contribute to the implementation of an integrated in vitro and in vivo approach to evaluate estrogenecity of chemicals in a model fish species, the zebrafish. To achieve this goal, new fish cells lines with luciferase reporter gene were developed and compared with existing in vitro models to evaluate potential inter-species (rainbow trout, human and zebrafish receptors) and/or inter-models differences. First, the comparison of xeno-estrogens effects on human estrogen receptor (hER) or rainbow trout estrogen receptor (rtER) showed the selectivity of some families of compounds for the rtER, including myco-oestrogens and derivatives of benzophenone (BPs), further demonstrating the interest of using specific fish models to assess estrogenic effect of compounds on aquatic species. Then, three specific zebrafish reporter gene models expressing each one of the three subtypes of zebrafish estrogen receptor (zfER) were developed from the liver cell line ZFL (zebrafish liver). These three new cell lines (ZELH-zfER\u03B1, ZELH zfER\u03B21-and-ZELH zfER\u03B22) have been characterized toward reference ligands and evidenced selective affinity according to the receptor. Finally, these new cell lines were used together with in vivo assays for the evaluation of estrogenic effects of 10 BPs. The BPs are used as UV filters in sunscreens and were detected in many environmental matrices. In vivo, we measured the expression of vitellogenin (Vtg) in adult male fish exposed during 7 days and the expression of brain aromatase (Aro b) in the larval stage (0-5 days post fertilization), by using transgenic zebrafish expressing GFP under the control of the Aro b promoter (cyp19a1b). This integrated approach has shown an adequacy between BPs in vitro effects on zfER\u03B22 and in vivo effect on aro b. Nevertheless, some discrepancies between the estrogenic effects across levels of biological organization are observed, for example, the benzophenone 2 (BP2) is strongly estrogenic in vitro and in vivo on adult fish but has no effect at the larval stage. Conversely, BP3 had weak estrogenicity in vivo (Vtg) and in vitro only on ZELH-zfER\u03B22. In conclusion, this study highlights the interest of using an integrated in vitro and in vivo approach to assess the estrogenicity of chemicals." . "Text" . . . "Th\u00E8ses et \u00E9crits acad\u00E9miques" . . . . . . . .