. "Bv-2" . "Acox1" . . "Extraits de cactus" . . "Th\u00E8ses et \u00E9crits acad\u00E9miques" . "Inflammation" . . "Acyl-CoA oxidase 1 (ACOX1) deficiency is a rare and severe peroxisomal leukodystrophy associated with a very long-chain fatty acids \u03B2-oxidation defect. As peroxisomal defects in microglia appear to be a key component of physiopathogenesis in ACOX1 deficiency, we used the murine BV-2 microglial cell line as model: (i) to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory properties of Opuntia ficus-indica cactus cladode extracts; (ii) to characterize a new BV-2 ACOX1 deficient cell line recently generated in our laboratory by CRISPR/Cas9 gene editing. In the first part of this work, the microglia activation, achieved by BV-2 cells exposition to four structurally and biologically well-defined lipopolysaccharides (LPS) serotypes, exhibited a LPS structure-related differential effect on fatty acid \u03B2-oxidation and antioxidant enzymes in peroxisomes: LPS derived from Escherichia coli diminished ACOX1 activity while LPS from Salmonella minnesota decreased catalase activity. Interestingly, microglial catalase activity activation was obtained by different cactus extracts. This antioxidant effect was accompanied by an anti-inflammatory effect revealed by the reduction of nitric oxide (NO) LPS-dependent production. Our results suggest that cactus extracts may have a neuroprotective activity in activated microglial cells through the induction of peroxisomal antioxidant activity and the inhibition of NO production. In the second part, the characterization of the BV-2 ACOX1 deficient cell line, with allelic mutations, confirmed the absence of ACOX1 protein and enzymatic activity. Although the mutant cells grew more slowly than control cells, they didn\u2019t show any discernible morphological changes. However, catalase activity, due to the peroxisomal H2O2-degrading enzyme, was significantly enhanced. Subcellular fractionation and ultracentrifugation on Nycodenz gradient studies revealed a relative modification in size and density of peroxisomes in ACOX1-deficient cells. Besides this, ACOX1 deficient cells show a profound modification of inflammatory gene expression (IL-1b, IL-4, TNF-\uF061) and particularly of CCL2/MCP-1 protein, which is involved in neuroinflammation. This new Acox1-deficient cell line presents the same biochemical changes shown in the human ACOX1 deficiency and represents a promising model to decipher the consequences of a specific microglial peroxisomal \u03B2-oxidation defect on peroxisomal functions, oxidative stress, inflammation and cellular functions." . . "La d\u00E9ficience en Acyl-CoA oxydase 1 (ACOX1) est une leucodystrophie peroxysomale rare et s\u00E9v\u00E8re associ\u00E9e \u00E0 un d\u00E9ficit dans la beta-oxydation des acides gras \u00E0 tr\u00E8s long chaine. A cause du r\u00F4le cl\u00E9 de ce d\u00E9ficit peroxysomal microglial dans la physiopathogen\u00E8se de la d\u00E9ficience en ACOX1, nous avons utilis\u00E9 la lign\u00E9e microgliale murine BV-2 comme mod\u00E8le : (i) pour \u00E9valuer les propri\u00E9t\u00E9s antioxydantes et anti-inflammatoires des extraits de raquettes du cactus Opuntia ficus-indica ; (ii) pour caract\u00E9riser une nouvelle lign\u00E9e BV-2 d\u00E9ficiente en ACOX1 g\u00E9n\u00E9r\u00E9e r\u00E9cemment dans notre laboratoire par \u00E9dition g\u00E9nique gr\u00E2ce \u00E0 la m\u00E9thode CRISPR-Cas9. Dans la premi\u00E8re partie des travaux, les cellules BV-2, activ\u00E9es par exposition \u00E0 quatre s\u00E9rotypes de lipopolysaccharides (LPS), montre un lien entre la structure du LPS et l\u2019effet sur la \uF062-oxydation des acides gras et les enzymes antioxydantes dans le peroxysome : les LPS d\u00E9rivant d\u2019Escherichia coli diminuent l\u2019activit\u00E9 ACOX1 alors que les LPS de Salmonella minnesota r\u00E9duisent l\u2019activit\u00E9 catalase. Remarquablement, les diff\u00E9rents extraits de cactus stimulent l\u2019activit\u00E9 catalase. Cet effet antioxydant est accompagn\u00E9 par un effet anti-inflammatoire attest\u00E9 par la r\u00E9duction de la production LPS-d\u00E9pendante d\u2019oxyde nitrique dans les BV-2. Nos r\u00E9sultats sugg\u00E8rent que les extraits de cactus auraient une activit\u00E9 neuroprotectrice sur les cellules microgliales activ\u00E9es \u00E0 travers l\u2019induction d\u2019activit\u00E9s anti-oxydantes peroxysomales et l\u2019inhibition de la production de NO. Dans la deuxi\u00E8me partie des travaux, la caract\u00E9risation de la lign\u00E9e BV-2 d\u00E9ficiente en ACOX1, portant des mutations all\u00E9liques, confirme l\u2019absence de la prot\u00E9ine et de l\u2019activit\u00E9 ACOX1. Bien que ces cellules aient une croissance plus faible, elles ne montrent pas de modifications morphologiques d\u00E9tectables. Par contre, l\u2019activit\u00E9 catalase, due \u00E0 l\u2019enzyme peroxysomale d\u00E9gradant l\u2019H2O2, est augment\u00E9e. Les \u00E9tudes par fractionnement subcellulaire et par ultracentrifugation en gradient Nycodenz r\u00E9v\u00E8lent une modification de la densit\u00E9 et de la taille de peroxysomes. De plus, ces cellules microgliales d\u00E9ficientes montrent une profonde modification de l\u2019expression des g\u00E8nes li\u00E9s \u00E0 l\u2019inflammation (IL-1b, IL-4, TNF-alpha) et particuli\u00E8rement l\u2019expression de la prot\u00E9ine CCL2/MCP-1 impliqu\u00E9e dans la neuro-inflammation. Cette nouvelle lign\u00E9e microgliale d\u00E9ficiente en ACOX1 r\u00E9v\u00E8lent les m\u00EAmes d\u00E9r\u00E9gulations biochimiques que celles d\u00E9crites chez les patients d\u00E9ficients en ACOX1 et repr\u00E9sente donc un mod\u00E8le pour l\u2019\u00E9tude des cons\u00E9quences du d\u00E9ficit de la \uF062-oxydation peroxysomale dans la microglie sur les fonctions peroxysomales, le stress oxydatif, l\u2019inflammation et les fonctions cellulaires." . . "Text" . . . "2018" . . . . . "Antioxydant" . . . . "Microglie" . "Effects of extracts from cactus cladode -Opuntia ficus indica- on the modulation of oxidative stress and inflammatory process related to acyl-CoA oxidase 1 deficiency and characterization of a BV-2 cell line inactivated for ACOX 1" . . "Effets d'extraits de raquette du cactus -Opuntia ficus indica- sur la modulation du stress oxydant et du processus inflammatoire li\u00E9s \u00E0 la d\u00E9ficience en acyl-CoA oxydase 1 et caract\u00E9risation d'une lign\u00E9e cellulaire BV-2 inactiv\u00E9e pour l'ACOX 1" . "Antioxydants" . "Cactus" . "Effets d'extraits de raquette du cactus -Opuntia ficus indica- sur la modulation du stress oxydant et du processus inflammatoire li\u00E9s \u00E0 la d\u00E9ficience en acyl-CoA oxydase 1 et caract\u00E9risation d'une lign\u00E9e cellulaire BV-2 inactiv\u00E9e pour l'ACOX 1" .