"Syst\u00E8mes toxines-antitoxines" . "Nucl\u00E9otidyltransf\u00E9rase" . "Syst\u00E8mes toxine-antitoxine" . . "Nucl\u00E9otidyltransf\u00E9rases" . "M\u00E9canisme mol\u00E9culaire" . "Les syst\u00E8mes Toxine-Antitoxine (TA) sont de petits modules g\u00E9n\u00E9tiques organis\u00E9s en op\u00E9ron, et compos\u00E9s d'une toxine et d'une antitoxine antagoniste qui inhibe l'activit\u00E9 de la toxine ou son expression. Les syst\u00E8mes TA sont des \u00E9l\u00E9ments sensibles au stress dont les fonctions cellulaires restent largement inconnues. Notre travail se concentre sur l'identification des cibles cellulaires et la d\u00E9couverte du m\u00E9canisme des syst\u00E8mes TA de type nucl\u00E9otidyltransf\u00E9rase (NTase) chez l'agent pathog\u00E8ne humain Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis). Dans ce travail de th\u00E8se, nous avons \u00E9tudi\u00E9 les quatre toxines de type NTase de la famille DUF1814 (MenT1-4) cod\u00E9es par M. tuberculosis. Nous avons montr\u00E9 que les toxines MenT1, MenT3 et MenT4 inhibaient la croissance bact\u00E9rienne, lorsqu'elle ne sont pas antagonis\u00E9es par leur antitoxine apparent\u00E9e, c'est-\u00E0-dire MenA1, MenA3, et MenA4. Avec nos collaborateurs, nous avons r\u00E9solu les structures des toxines MenT3 et MenT4 \u00E0 une r\u00E9solution de 1,6 \u00C5 et 1,2 \u00C5, respectivement, et identifi\u00E9 l'activit\u00E9 biochimique et la cible de MenT3. MenT3 bloque la synth\u00E8se prot\u00E9ique in vitro et emp\u00EAche l'aminoacylation d'ARNt in vivo. MenT3 ajoute des pyrimidines (C ou U) \u00E0 l'extr\u00E9mit\u00E9 acceptrice 3'-CCA des ARNt non charg\u00E9s, et a montr\u00E9 une forte sp\u00E9cificit\u00E9 de substrat in vitro, ciblant pr\u00E9f\u00E9rentiellement l'ARNtSer parmi les 45 ARNt present chez M. tuberculosis. Ainsi, la toxine MenT3 pourrait fonctionner comme une ARNt NTase qui bloque la traduction par un m\u00E9canisme non d\u00E9crit pr\u00E9c\u00E9demment impliquant l'inactivation des ARNt s\u00E9rine. En conclusion, nos travaux identifient un m\u00E9canisme jusque-l\u00E0 inconnu qui \u00E9largit la gamme des activit\u00E9s enzymatiques utilis\u00E9es par les toxines bact\u00E9riennes, d\u00E9couvrant une nouvelle fa\u00E7on de bloquer la synth\u00E8se des prot\u00E9ines." . "Th\u00E8ses et \u00E9crits acad\u00E9miques" . "Toxin-antitoxin (TA) systems are small genetic modules organized in operon and composed of a protein toxin and an antagonistic antitoxin, which can inhibit toxin activity or its expression. TA systems are widespread stress-responsive elements, many of whose cellular functions remain largely unknown. Our work focuses on identifying the cellular targets and discovering the mechanism of nucleotidyltransferase (NTase)-like family TA systems in the human pathogen, Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis). In this thesis work, we have investigated the four DUF1814-family NTase-like toxins (MenT1-4) encoded by M. tuberculosis. Toxins MenT1, MenT3 and MenT4 inhibited bacterial growth and were blocked by their cognate antitoxins, MenA1, MenA3, and MenA4. With our collaborators, we have solved the structures of toxins MenT3 and MenT4 to 1.6 \u00C5 and 1.2 \u00C5 resolution, respectively, and identified the biochemical activity and target of MenT3. MenT3 blocked in vitro protein expression and prevented tRNA charging in vivo. MenT3 added pyrimidines (C or U) to the 3'-CCA acceptor stems of uncharged tRNAs and exhibited strong substrate specificity in vitro, preferentially targeting tRNASer from amongst the 45 M. tuberculosis tRNAs. Thus, the toxin MenT3 could function as a tRNA NTase that blocks translation through a previously undescribed mechanism involving inactivation of serine tRNAs. In conclusion, our work identifies a previously unknown mechanism that expands the range of enzymatic activities employed by bacterial toxins, uncovering a new way to block protein synthesis." . "Mycobacterium tuberculosis" . . . . . . "Molecular mechanism of a new family of Toxin-Antitoxin systems with conserved nucleotidyltransferase (NTase)-like toxins in Mycobacterium tuberculosis" . . . . . . . "M\u00E9canisme mol\u00E9culaire d'une nouvelle famille de syst\u00E8mes toxine-antitoxine avec des toxines de type nucl\u00E9otidyltransf\u00E9rase (NTase) conserv\u00E9es chez Mycobacterium tuberculosis" . . "M\u00E9canisme mol\u00E9culaire d'une nouvelle famille de syst\u00E8mes toxine-antitoxine avec des toxines de type nucl\u00E9otidyltransf\u00E9rase (NTase) conserv\u00E9es chez Mycobacterium tuberculosis" . "Text" . . "2020" .